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全自動(dòng)定氮儀的具體實(shí)驗(yàn)步驟介紹

更新時(shí)間:2020-04-15點(diǎn)擊次數(shù):2514
  全自動(dòng)定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理,通過(guò)測(cè)定樣品中氮的含量從而計(jì)算蛋白質(zhì)含量的儀器。
  首先簡(jiǎn)單為您介紹一下該產(chǎn)品的原理,該產(chǎn)品是將有機(jī)化合物與硫酸共熱使其中的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。在這一步中,經(jīng)常會(huì)向混合物中加入硫酸鉀來(lái)提高中間產(chǎn)物的沸點(diǎn)。樣本的分析過(guò)程的終點(diǎn)很好判斷,因?yàn)檫@時(shí)混合物會(huì)變得無(wú)色且透明,在得到的溶液中加入少量氫氧化鈉,然后蒸餾。這一步會(huì)將銨鹽轉(zhuǎn)化成氨。而總氨量會(huì)由反滴定法確定:冷凝管的末端會(huì)浸在硼酸溶液中。氨會(huì)和酸反應(yīng),而過(guò)量的酸則會(huì)在甲基橙的指示下用碳酸鈉滴定。滴定所得的結(jié)果乘以特定的轉(zhuǎn)換因子就可以得到結(jié)果。
  全自動(dòng)定氮儀的實(shí)驗(yàn)方法有取樣、樣品消化、蒸餾、滴定四個(gè)步驟,其原理較為復(fù)雜,使用的試劑也比較多,以下將對(duì)這四個(gè)步驟進(jìn)行簡(jiǎn)單講述。
  1 樣品的取樣
  取樣應(yīng)具有代表性,取樣前將樣品充分混勻,固體試樣可用粉碎設(shè)備制成細(xì)小均勻粉末。稱(chēng)量放入凱氏定氮瓶時(shí),切勿使樣品粘附在瓶頸部,避免樣品未消化*而造成氮損失。
  2 樣品的消化
  樣品中含氮有機(jī)化合物經(jīng)硫酸在加熱的條件下消化,硫酸的作用促使有機(jī)物脫水炭化。含氮的有機(jī)物炭化并生成碳,碳在將硫酸還原為二氧化硫的反應(yīng)中,自身則被氧化成為二氧化碳;反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的二氧化硫?qū)⒌€原為氨氣,此過(guò)程中其自身則被氧化成三氧化硫;而消化過(guò)程生成的氫,又加速了氨的形成。生成的水以水蒸氣的形式連同反應(yīng)過(guò)程中生成的三氧化硫一同逸出,而氨氣則以硫酸銨的形式留在消化液中。
  3、蒸餾
  水蒸氣發(fā)生器中的水要呈酸性,因水中可能含有微量的氨離子,防止其受熱溢出而影響測(cè)定結(jié)果。
  4、滴定
  氨以氣體的形式被釋放出來(lái),用硼酸溶液吸收后,使用鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行酸堿滴定,從而計(jì)算出樣品中蛋白質(zhì)的含量。
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